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        小鼠組蛋白H2b酶聯(lián)免疫分析試劑盒質(zhì)量檢測
        更新時(shí)間:2024-04-08   點(diǎn)擊次數:167次

        小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)酶聯(lián)免疫分析試劑盒質(zhì)量檢測:

        1)紫外吸收法測定

        先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋?zhuān)?:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

        濃度測定

        A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。具體計算如下:

        RNA溶于40 l DEPC水中,取5ul,1:100稀釋至495的TE中,測得A260 = 0.21

        RNA 濃度= 0.21 ×100 ×40 g/ml = 840 g/ml 或 0.84 g

        取5ul用來(lái)測量以后,剩余樣品RNA為35 l,剩余RNA總量為:

        35 l × 0.84 gl = 29.4 g

        ②純度檢測

        RNA溶液的A260/A280的比值即為RNA純度,比值范圍1.8到2.1。

        2)變性瓊脂糖凝膠電泳測定

        ①制膠

        1g瓊脂糖溶于72ml水中,冷卻至60℃,10 ml的10× MOPS電泳緩沖液和18 ml的37% 甲醛溶液(12.3 M)。

        10×MOPS電泳緩沖液

        濃度 成分

        0.4M MOPS,pH 7.0

        0.1M 乙酸鈉

        0.01M EDTA

        灌制凝膠板,預留加樣孔至少可以加入25 l溶液。膠凝后取下梳子,將凝膠板放入電泳槽內,加足量的1×MOPS電泳緩沖液至覆蓋膠面幾個(gè)毫米。


         

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